作品描绘了《新约全书》里的一个故事，画中引人注目的是对使徒内心挣扎的描绘，他的信仰和忠诚输给了内心的恐惧。黑暗中，两名士兵焦急地等待着圣彼得的回答：究竟他认不认识耶稣。画面右后方的背景里，耶稣和一些旁观者转过头，也在仔细聆听着。伦勃朗通过不知名的光源照亮圣彼得，把描绘的重心放在他那张满是愁容的脸上。他运用了一种全新的技艺，把调色刀和画笔结合起来处理颜料。画布上还留下几块空白未涂油彩，这在伦勃晚期的历史题材作品中十分常见。